Primera identificación molecular del transgen de la
proteína fluorescente roja (RFP) en peces Cebra (Danio rerio) transgénicos
ornamentales introducidos en el Perú
Carlos
Scotto, Fernando Serna
Revista Científica de la Universidad Nacional de Trujillo
Scientia Agropecuaria Vol 4 (3). 2013.
RESUMEN
En el presente trabajo se identificó por primera vez peces Cebra
transgénicos (Danio rerio) fluorescentes de color rojo, naranja y rosado introducidos al
territorio peruano de acuarios locales utilizando la técnica de PCR para
amplificar el transgen RFP perteneciente a la anémona marina Discosoma spp. Se
encontró una expresión génica diferencial del transgen de la proteína
fluorescente roja (RFP) que determinaría una gradiente de bioluminiscencia para
cada color entre los peces OVM analizados. Se realizó un análisis de secuencias
de las dos variantes de la RFP junto con las seis variantes de la GFP de
proteínas fluorescentes existentes en el Genbank que podrían ayudar a
identificar rápidamente si son nuevos genes o si son nuevas variantes de éstas
proteínas fluorescentes y que podrían ser utilizadas en otros OVMs
hidrobiológicos a futuro. De este modo, desarrollar y optimizar las
medidas de bioseguridad mediante su oportuna detección a nivel genético
molecular.
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REFERENCIAS
Amsterdam, A.; Lin, S.;
Hopkins, N. 1995. The Aequorea Victoria
green fluorescent protein can be used as a reporter in live zebrafish embryos.
Developmental Biology 171: 123-129.
Bielikova, M.; Bukovska, G.; Vavrova, S.;
Timko, J.; Turna, J. 2012. Identification of genetically modified zebrafish
(Danio rerio) by PCR methods. Disponible en:
http:
gmoglobalconference.jrc.ec.europa.eu/ Posters.htm
Chung, O. 2006. Biotechnology: Nightlights for the Aquarium. Taiwan
Review April: 40-45.
DNA2.0. 2013. IP-Free™ Fluorescent Proteins. Disponible
en: https: www.dna20.com/wp-content/uploads/2013/
04/Intellectual_Property_Statement.pdf
Genbank. Disponible
en: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/ genbank/
Gong, Z.; Ju, B.; Wan, H. 2001. Green fluorescent protein (GFP)
transgenic fish and their applications. Genetica 111: 213-225.
Gong, Z.; Wan,
H.; Leng, Tay.; Wang, H.; Chen, M.; Yan, T. 2003. Development of transgenic
fish for ornamental and bioreactor by strong expression of fluorescent proteins
in the skeletal muscle. Biochemical and Biophysical Research Communications
308: 58–63.
Hall, T.A. 1999. BioEdit: a user-friendly biological sequence
alignment editor and analysis program for Windows 95/98/NT. Nucleic Acids
Symposium Series 41: 95-98.
Jeanmougin, F.; Thompson, J.; Gouy, M.; Higgins,
D.; Gibson, T. 1998. Multiple sequence alignment with Clustal X. Trends in
Biochemical Science 23:403-405.
Kumar,
S.; Nei, M; Dudley, J.; Tamura, K. 2008. MEGA: A biologist-centric software for evolutionay analysis of DNA and
protein sequences. Briefings in Bioinformatics
9(4): 299-306.
Ley Nº 27104. Ley de prevención de riesgos derivados del uso
de la biotecnología. (1999, mayo 12). Diario Oficial El Peruano, pp. 173055.
Ley
Nº 29811. Ley que establece la moratoria al ingreso y producción de organismos
vivos modificados al territorio nacional por un período de 10 años. (2011,
Noviembre 17). Diario Oficial El Peruano, pp. 454601.
Matz, M.; Fradkov, A.;
Laba, Y.; Savitsky, A.; Zaraisky, A.; Markelov, M.; Lukyanov, S. 1999. Fluorescent proteins from nonbioluminescent
Anthozoa species. Nature Biotechnology 17: 969-973.
Pan, X.; Zhan, H.; Gong,
Z. 2008. Ornamental Expression of Red Fluorescent Protein in Transgenic
Founders of White Skirt Tetra (Gymnocorymbus ternetzi). Marine Biotechnology
10: 497–501.
Patterson, G.; Day, R.; Piston, D. 2001. Fluorescent protein
spectra. Journal Cell Science Mar 114: 837-838.
Petersen, J.; Wilmann, P.;
Beddoe, T.; Oakley, A.; Devenish, R.; Prescott, M.; Rossjohn, J. 2003. The
2.0-A crystal structure of eqFP611, a far red fluorescent protein from the sea
anemone Entacmaea quadricolor. The Journal of Biological Chemistry 278:
44626-44631.
Prasher, D.; Eckenrode,V.; Ward, W.; Prendergast, F.; Cormier, M.
1992. Primary structure of the Aequorea victoria green-fluorescent protein.
Gene 111(2): 229-233.
Rehbein, H.; Bogerd, J. 2007. Identification of
Genetically Modified Zebrafish (Danio rerio) by Protein- and DNA-Analysis.
Journal fur Verbracherschutz und Lebensmittelsicherheit. 2: 122-125.
Shagin,
D.; Barsova, E.; Yanushevich, Y.; Fradkov, A.; Lukyanov, K.; Labas, Y.;
Semenova, T.; Ugalde, J.; Meyers, A.; Nunez, J.; Widder, E.; Lukyanov, S.;
Mikhail, M. 2004. GFP-like Proteins as Ubiquitous Metazoan Superfamily:
Evolution of Functional Features and Structural Complexity. Molecular Biology
and Evolution 21 (5): 841-850.
Shaner, N.; Campbell, R.; Steinbach, P.;
Giepmans, B.; Palmer, A.; Tsien, R. 2004. Improved monomeric red, orange and
yellow fluorescent proteins derived from Discosoma sp. red fluorescent protein.
Nature Biotechnology 22: 1567-1572.
Shaner, N.; Steinbach, P.; Tsien, R. 2005. A guide
to choosing fluorescent proteins. Nature
Methods 2: 905-909.//Scotto, C. 2011. Peces transgénicos fluorescentes en el
Perú: Bioseguridad y análisis de riesgos pendientes. The Biologist (Lima) 8:
235-243.
Scotto, C. 2012. Nota Científica: Reproducción e hibridación de peces
transgénicos fluorescentes en cautiverio: un alcance prospectivo. Scientia
Agropecuaria 3(1): 89-93.
Tanaka, M.; Kinoshita, M.; Kobayashi, D.; Nagahama,
Y. 2001. Establishment of medaka
(Oryzias latipes) transgenic lines with the expression of green fluorescent
protein fluorescence exclusively in germ cells: a useful model to monitor germ
cells in a live vertebrate. Proceeding National
Academic Science USA 98(5): 2544-2549.
Tsien, R. 1998. The green fluorescent protein (Review). Annual Review of
Biochemistry 67: 509-544.//UniProtKB. 2013. Protein knowledge base. Disponible en: http://www.uniprot.org.
Verkhusha, V.; Lukyanov, K.
2004. The molecular properties
and applications of Anthozoa fluorescent proteins and chromoproteins. Nature
Biotechnology 22:289-296.
Wall, M.; Socolich, M.; Ranganathan, R. 2000. Nature
Structural Biology 7(12): 1133-1138.
Wan, H.; He, J.; Ju, B.; Yan, T.; Lam,
T.; Gong, Z. 2002. Generation of Two-color Transgenic Zebrafish Using the Green
and Red Fluorescent Protein Reporter Genes GFP and RFP. Marine Biotechnology 4:
146–154.
Wiedenmann, J.; Schenk, A.; Roecker, C.; Girod A.; Spindler, K.-D.;
Nienhaus, G. 2002. A far-red fluorescent protein with fast maturation and
reduced oligomerization tendency from Entacmaea quadricolor (Anthozoa,
Actinaria). Proceeding National Academy Science U.S.A. 99(18): 11646-11651.
Zeng
Z.; Liu, X.; Seebah, S.; Gong, Z. 2005. Faithful expression of living color
reporter genes in transgenic medaka under two tissue-specific zebrafish
promoters. Developmental Dynamics 234:
387–392
REFERENCIAS (internas al blog):
